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单项选择题男孩，12岁，左大腿下端持续剧痛伴高热3天，寒战，头痛，食欲差。查体：体温39℃，左大腿下端稍肿，局部皮温高，深压痛，右膝活动时疼痛加重。化验检查：白细胞1.8×10/L，中性粒细胞0.75。对确诊最有价值的辅助检查是（）

A、局部分层穿刺

B、结核菌素试验

C、X线片检查

D、膝关节穿刺

E、肌肉活检

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